【摘 要】
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将已有的低温脂肪酶基因克隆至表达载体pPICZα上,并转化毕赤酵母X-33。在低温条件下诱导培养6d后,发酵液中可检测到低温脂肪酶活力。重组酵母发酵液加入二硫苏糖醇后单位酶
【机 构】
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中国海洋大学,国家海洋局第一海洋研究所,青岛康地恩生物科技有限公司
【基金项目】
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国家高技术发展研究计划项目——极地特殊海洋微生物资源利用的关键技术研究(2007AA091905), 海洋公益性行业科研专项——盐生植物生产纤维素乙醇与电厂废气联产生物柴油研究与示范(201005031) 利用极地微生物生产低温纤维素酶关键工程化技术开发与应用研究(201005020-8) 绿潮藻纤维素乙醇的制备技术研究(201105028-02), 国家海洋局海洋生物活性物质重点实验室开放基金—
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将已有的低温脂肪酶基因克隆至表达载体pPICZα上,并转化毕赤酵母X-33。在低温条件下诱导培养6d后,发酵液中可检测到低温脂肪酶活力。重组酵母发酵液加入二硫苏糖醇后单位酶活力达到32U/mL,与未加入该试剂的原始菌株相比提高4倍以上。对重组脂肪酶的酶学性质研究表明,其最适pH为8.0,最适温度为35℃,50℃温浴30min后,仍有30.04%的活性。以不同碳链长度的4-Nitrophenyl Ester为底物检测其底物特异性,结果显示其较适合作用于短链底物。重组酵母能够在BMMY培养基中胞外分泌表达带有
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