【摘 要】
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目的制备一种新型的膜联蛋白Ⅴ，用异硫氰酸荧光素进行标记，观察它对外露磷脂酰丝氨酸（PS）红细胞的荧光染色情况。方法带有金属螯合位点的膜联蛋白Ⅴ通过毕赤酵母的培养和甲醇诱导
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医院核医学科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助（30500573,30670741）,霍英东肺癌专项基金资助
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目的制备一种新型的膜联蛋白Ⅴ，用异硫氰酸荧光素进行标记，观察它对外露磷脂酰丝氨酸（PS）红细胞的荧光染色情况。方法带有金属螯合位点的膜联蛋白Ⅴ通过毕赤酵母的培养和甲醇诱导表达获得，膜联蛋白Ⅴ粗品通过离子交换和硫酸铵沉淀得到纯化产物。在硼酸盐缓冲液完成膜联蛋白Ⅴ的异硫氰酸荧光素标记，标记产物经过离子交换进行纯化。红细胞经过戊二醛处理后PS外露于细胞表面。在荧光显微镜下观察异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白Ⅴ对外露PS红细胞的结合。结果毕赤酵母重组表达的新型膜联蛋白Ⅴ经过离子交换和硫酸铵沉淀后得以纯化和浓缩。经过异
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