【摘 要】
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目的探讨用Western blot技术检测胞质中细胞色素C（Cyt C）的最佳转膜时间。方法取大鼠小肠上皮细胞,提取胞质蛋白。蛋白定量后,取20μg样品上样于聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。
【基金项目】
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中国医学科学院2010协和青年基金
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目的探讨用Western blot技术检测胞质中细胞色素C（Cyt C）的最佳转膜时间。方法取大鼠小肠上皮细胞,提取胞质蛋白。蛋白定量后,取20μg样品上样于聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）。取22μm孔径硝酸纤维素膜（NC膜）,电压100 V,分别电转移15、30、60、90、120 min。NC膜用丽春红染色,蒸馏水漂洗后加入Cyt C一抗、二抗孵育,放射自显影显色。结果在转膜过程中,随着时间的增加,转移到NC膜的总蛋白增多;而Cyt C条带出现了先增加（30 min）,后减少,再增加（120
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