【摘 要】
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目的 利用自行设计的引物、探针和新型铕螯合物BHHCT,建立一种半定量丙型肝炎病毒(HCV)RNA的检测方法。方法 收集44份丙型肝炎病人血清,20份正常人血清。利用中山大学达安基
【机 构】
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南京医科大学第一附属医院临床检验中心; 南京医科大学第一附属医院临床检验中心 210029; 210029;
【基金项目】
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江苏省科委社会发展项目(99038)
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目的 利用自行设计的引物、探针和新型铕螯合物BHHCT,建立一种半定量丙型肝炎病毒(HCV)RNA的检测方法。方法 收集44份丙型肝炎病人血清,20份正常人血清。利用中山大学达安基因有限公司RNA提取试剂提取HCV RNA,用自行设计的引物进行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)。扩增产物cDNA与微孔板上的捕捉探针杂交后,借助于其上游引物5′端带有的生物素,与标记有铕的链霉亲合素特异性结合,将铕连接到微孔板上,在特定波长激发光激发下,发出荧光,进行检测。结果 铕标记HCV RNA检测法的线性范围为102-106cDNA拷贝,敏感性、特异性均为100%。结论 铕标记RT-PCR检测HCV RNA法的线性范围宽,敏感性、特异性好,检测时间短,无放射性污染,有推广应用的价值。
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