Expression and Characterization of HIV-1 Envelope Glycoprotein in Pichia Pastoris

来源 :Chemical Research in Chinese Universities | 被引量 : 0次 | 上传用户:hxhbj2009
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To obtain a sufficient amount of glycoprotein for further studying the structure and function of HIV-1 envelope glycoprotein, amplified and modified HIV-1 envelope glycoprotein gene which recombined subtypes(850 amino acids) from Guangxi in China was inserted into Pichia pastoris expression vector pPICZαB; then the recombinant plasmid was transported into the yeast cells to induce the expression of Env protein with methanol. The results of SDS-PAGE and Western blot indicate that the envelope glycoprotein could be expressed in Pichia pastoris with productions of a 120000 glycoprotein and a 41000 glycoprotein, which showed satisfactory immunogenicity by indirect ELISA. To obtain a sufficient amount of glycoprotein for further studying the structure and function of HIV-1 envelope glycoprotein, amplified and modified HIV-1 envelope glycoprotein gene which recombined subtypes (850 amino acids) from Guangxi was China inserted into Pichia pastoris expression vector pPICZαB ; then the recombinant plasmid was transported into the yeast cells to induce the expression of Env protein with methanol. The results of SDS-PAGE and Western blot indicate that the envelope glycoprotein could be expressed in Pichia pastoris with productions of a 120000 glycoprotein and a 41000 glycoprotein, which showed satisfactory immunogenicity by indirect ELISA.
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