【摘 要】
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目的：构建重组牛肠激酶轻链的基因工程菌，并进行表达和纯化，以获得高纯度和高活性的重组牛肠激酶轻链蛋白。方法：以GenBank公共数据库中的牛肠激酶轻链基因序列（Accession No．NMl74
【机 构】
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苏州大学生命科学学院,重庆富进生物医药有限公司
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(30471250)
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目的：构建重组牛肠激酶轻链的基因工程菌，并进行表达和纯化，以获得高纯度和高活性的重组牛肠激酶轻链蛋白。方法：以GenBank公共数据库中的牛肠激酶轻链基因序列（Accession No．NMl74439）设计引物，利用RT-PCR合成牛肠激酶轻链基因片段，并克隆进pPIC9K载体，同时在基因N端插进6个组氨酸标签，转化毕赤酵母GS115，进行筛选和诱导表达。产物经镍离子螯和层析和Q—Sepharose FF柱纯化，并酶切融合蛋白检测其活性。结果：培养液中重组牛肠激酶轻链蛋白表达量为3．0mg／L。对含有肠
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