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基质金属蛋白酶-7(MMP-7)即基质溶解素在多种实体瘤中高表达并与肿瘤的发生及转移侵润有关。然而MMP-7在成人急性淋巴细胞白血病(A)的表达及意义尚未见报道。本研究通过免疫组织化学P法测定成人A中MMP-7和 -catenin的表达初步探讨其在成人A中的表达及意义。
资料与方法
1年月~1年7月收治初治成人A患者7例依据1986年AB制定MI分型标准确诊其中男8例女19例年龄15~65岁平均7.5岁肝脾淋巴结肿大(浸润组)例无肝脾淋巴结肿大(无浸润组)1例对照组为健康志愿者1例男1例女9例年龄1~71岁平均6.岁。
检测方法:用免疫细胞化学P法检测骨髓单个核细胞(BMMN)中MMP-7和 -catenin。MMP-7和 -catenin单克隆抗体、-P免疫标记试剂盒。髂后或髂前上嵴穿刺取骨髓用淋巴细胞分离液(比重1.77)分离BMMN并涂片干燥后用新鲜配制的丙酮溶液于室温下固定分钟用磷酸盐缓冲液(.1mol/PH 7.)漂洗次;.1 Triton1通透1分钟再用PB漂洗次然后根据试剂说明书进行操作。每一批实验均设阳性及阴性对照阳性对照采用胃癌切片(由试剂公司提供)阴性对照以PB代替一抗。
结果判定:细胞质或细胞核出现棕黄色颗粒染色为阳性。根据阳性颗所占的面积及显色程度参照1997年全国免疫组化技术诊断标准化专题研讨会意见对阳性细胞进行积分:细胞质和(或)核内见浅黄色颗粒明显高于背景底色阳性颗粒所占细胞面积的比例<5 1分;细胞质和(或)核内见较深黄色颗粒阳性颗粒所占细胞面积的比例51~7 分;细胞质和(或)核内见大量深黄色颗粒浆和(或)核有时可被颗粒掩盖而不显阳性颗粒所占细胞面积的比例>7 分。每片统计5个细胞中的阳性细胞数结合每个细胞的积分算出总阳性积分平均阳性积分=总阳性积分/5。并换算为每1个细胞的阳性积分。
统计学处理:应用P1.统计软件进行统计学处理多组均数间采用t检验两变量间相关性采用pearson相关分析检验水准 =.5。
结果
MMP-7和 -catenin阳性产物呈棕黄色颗粒状定位于胞浆内。初治组MMP-7和 -catenin平均积分显著高于对照组(P<.5)。肝脾淋巴结肿大组MMP-7和 -catenin平均积分显著高于无肝脾淋巴结肿大组(P<.5)。见表1。
MMP-7和 -catenin在A中表达的关系MMP-7和 -catenin的过表达呈正相关关系r=.51P<.5。
讨论
-catenin是一个多功能蛋白质一方面与E-钙黏蛋白形成黏附复合体介导细胞间的黏附连接另一方面 -catenin作为Wnt信号通路的关键分子在Wnt/ -catenin信号传导途径中介导信号传导。肿瘤细胞间黏附复合体功能丧失导致一方面细胞之间黏附减弱肿瘤细胞易脱离组织获得较强的侵袭能力;另一方面肿瘤细胞内 -catenin易位至细胞核内激活下游靶基因c-mycMMP-7等引起细胞增殖。MMP-7是基质金属蛋白酶(MMPs)家族中重要成员之一在实体瘤中已经证实与恶性肿瘤侵袭转移相关。本研究检测了MMP-7和 -catenin在成人A患者骨髓单个核细胞的表达结果表明成人A患者骨髓单个核细胞高表达MMP-7和 -catenin浸润组(肝脾淋巴结肿大)阳性积分显著高于无浸润组(无肝脾淋巴结肿大)P<.5提示MMP-7和 -catenin高表达可能与成人A髓外浸润有关。进一步分析发现MMP-7和 -catenin的表达呈正相关关系提示MMP-7和 -catenin可能在成人A的发生中起协同作用。本文结果提示检测成人A患者骨髓单个核细胞中MMP-7和 -catenin的表达可作为预后的参考指标对化疗方案的选择有一定的指导意义。
参考文献
1Maretto ,cordenonsi M,Dupont s,et al.Mapping wn/Bcatenin gignaIing during mouse development and in colorectal tumor[J].Proc Natl Acad sci Usa,,1(6):9-99.
Brooks A,omax-Browne HJ,arter TM,et al.Molecular interactions in cancer cell metastasis[J].Acta Histochem,1,11(1):-5.
黄建贤,朱宝和,黄林,等.MMP-与MMP-7在直肠癌中的表达及临床意义[J].中国实验诊断学,9,1(6):77-775.
赵振亚,宋晓昕.大肠管状腺瘤癌变过程中MMP-7的表达及意义[J].临床与实验病理学杂志,1,8(6):6-6.
资料与方法
1年月~1年7月收治初治成人A患者7例依据1986年AB制定MI分型标准确诊其中男8例女19例年龄15~65岁平均7.5岁肝脾淋巴结肿大(浸润组)例无肝脾淋巴结肿大(无浸润组)1例对照组为健康志愿者1例男1例女9例年龄1~71岁平均6.岁。
检测方法:用免疫细胞化学P法检测骨髓单个核细胞(BMMN)中MMP-7和 -catenin。MMP-7和 -catenin单克隆抗体、-P免疫标记试剂盒。髂后或髂前上嵴穿刺取骨髓用淋巴细胞分离液(比重1.77)分离BMMN并涂片干燥后用新鲜配制的丙酮溶液于室温下固定分钟用磷酸盐缓冲液(.1mol/PH 7.)漂洗次;.1 Triton1通透1分钟再用PB漂洗次然后根据试剂说明书进行操作。每一批实验均设阳性及阴性对照阳性对照采用胃癌切片(由试剂公司提供)阴性对照以PB代替一抗。
结果判定:细胞质或细胞核出现棕黄色颗粒染色为阳性。根据阳性颗所占的面积及显色程度参照1997年全国免疫组化技术诊断标准化专题研讨会意见对阳性细胞进行积分:细胞质和(或)核内见浅黄色颗粒明显高于背景底色阳性颗粒所占细胞面积的比例<5 1分;细胞质和(或)核内见较深黄色颗粒阳性颗粒所占细胞面积的比例51~7 分;细胞质和(或)核内见大量深黄色颗粒浆和(或)核有时可被颗粒掩盖而不显阳性颗粒所占细胞面积的比例>7 分。每片统计5个细胞中的阳性细胞数结合每个细胞的积分算出总阳性积分平均阳性积分=总阳性积分/5。并换算为每1个细胞的阳性积分。
统计学处理:应用P1.统计软件进行统计学处理多组均数间采用t检验两变量间相关性采用pearson相关分析检验水准 =.5。
结果
MMP-7和 -catenin阳性产物呈棕黄色颗粒状定位于胞浆内。初治组MMP-7和 -catenin平均积分显著高于对照组(P<.5)。肝脾淋巴结肿大组MMP-7和 -catenin平均积分显著高于无肝脾淋巴结肿大组(P<.5)。见表1。
MMP-7和 -catenin在A中表达的关系MMP-7和 -catenin的过表达呈正相关关系r=.51P<.5。
讨论
-catenin是一个多功能蛋白质一方面与E-钙黏蛋白形成黏附复合体介导细胞间的黏附连接另一方面 -catenin作为Wnt信号通路的关键分子在Wnt/ -catenin信号传导途径中介导信号传导。肿瘤细胞间黏附复合体功能丧失导致一方面细胞之间黏附减弱肿瘤细胞易脱离组织获得较强的侵袭能力;另一方面肿瘤细胞内 -catenin易位至细胞核内激活下游靶基因c-mycMMP-7等引起细胞增殖。MMP-7是基质金属蛋白酶(MMPs)家族中重要成员之一在实体瘤中已经证实与恶性肿瘤侵袭转移相关。本研究检测了MMP-7和 -catenin在成人A患者骨髓单个核细胞的表达结果表明成人A患者骨髓单个核细胞高表达MMP-7和 -catenin浸润组(肝脾淋巴结肿大)阳性积分显著高于无浸润组(无肝脾淋巴结肿大)P<.5提示MMP-7和 -catenin高表达可能与成人A髓外浸润有关。进一步分析发现MMP-7和 -catenin的表达呈正相关关系提示MMP-7和 -catenin可能在成人A的发生中起协同作用。本文结果提示检测成人A患者骨髓单个核细胞中MMP-7和 -catenin的表达可作为预后的参考指标对化疗方案的选择有一定的指导意义。
参考文献
1Maretto ,cordenonsi M,Dupont s,et al.Mapping wn/Bcatenin gignaIing during mouse development and in colorectal tumor[J].Proc Natl Acad sci Usa,,1(6):9-99.
Brooks A,omax-Browne HJ,arter TM,et al.Molecular interactions in cancer cell metastasis[J].Acta Histochem,1,11(1):-5.
黄建贤,朱宝和,黄林,等.MMP-与MMP-7在直肠癌中的表达及临床意义[J].中国实验诊断学,9,1(6):77-775.
赵振亚,宋晓昕.大肠管状腺瘤癌变过程中MMP-7的表达及意义[J].临床与实验病理学杂志,1,8(6):6-6.