电穿孔法高效转染脑胶质瘤细胞U251的条件优化研究

来源 :内蒙古医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:accessw2009
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目的探讨不同电穿孔条件对脑胶质瘤细胞U251电转染率的影响,旨在优化脑胶质瘤细胞U251的电穿孔转染条件以获得较高转染效率。方法以脑胶质瘤细胞系U251为研究对象,在300μl电转体系中,选择不同的电压、脉冲时间、细胞浓度、DNA剂量,将pEGFP-C1质粒导入U251,计算转染效率。结果在110V、脉冲250μs、细胞浓度1×106/ml、质粒2μg,转染效果最佳,转染后48 h阳性率约为69%。结论优化条件后的电穿孔法操作简单,经济省时,可用于脂质体等方法较难转染细胞(如脑胶质瘤细胞)的外源
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