早老性痴呆大脑cDNA文库构建及目的基因克隆

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：war_and

【摘要】

：

取临床确诊为早老性痴呆（Alzheimer's disease,AD）患者的大脑组织，应用磁珠法直接提取mRNA,电泳检测其质量，经逆转录合成双链cDNA后，用碱性凝胶电泳检测其大小在0．2－9.0kb范围，主

【作者】

：

李崎任宏伟等

【机构】

：

北京大学生命科学学院生物化学与分子生物学系蛋白质工程国家重点实验室,北京大学生命科学学院生

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2001年4期

【关键词】

：

早老性痴呆磁珠法大脑cDNA文库构建克隆目的基因 Alzheimer's disease paramagnetic particle met

【基金项目】

：

国家 95科技攻关项目资助 (No .96C0 20 1 0 9)&&

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取临床确诊为早老性痴呆（Alzheimer's disease,AD）患者的大脑组织，应用磁珠法直接提取mRNA,电泳检测其质量，经逆转录合成双链cDNA后，用碱性凝胶电泳检测其大小在0．2－9.0kb范围，主要集中在1.0-2.0kb之间，层析除去多余的adaptors，收集大于400bp的cDNA片段，与载体pYESTrp2连接，经电转化后，得到克隆总数为5．1×10^5的AD病人大脑cDNA文库，用PCR技术从该文库中扩增得到小肠三叶因子（intestinal trefoil fa

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