猪乙脑病毒重组E基因的克隆表达及间接ELISA检测方法研究

来源 :上海农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wangkaixin
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参照已发表的猪乙脑病毒(JEV)基因组序列,设计引物,扩增出 E 基因,克隆到 pMD19-T 载体中。序列分析表明:E 基因与 NCBI 登录的 JEV 毒株 E 基因序列同源性达到96.6%—99.7%;遗传进化分析表明:该 JEV属于 GIII 病毒。将 E 基因片段亚克隆到 pET32a-E,IPTG 诱导表达 E 蛋白。Western Blot 检测表明:该重组蛋白能与 JEV 高免血清发生非特异性反应,证明该表达产物为 JEV E 蛋白。以重组 E 蛋白为包被抗原,建立检测猪 JEV抗体的间接
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