N端融合TAT穿膜肽的piggyBac转座酶的原核表达及其在HEK 293细胞中的功能验证

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：cubqfire

【摘要】

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为了增加piggyBac （PB）转座系统在转基因操作中安全性和减少PB转座系统的辅助质粒带来的副作用，本研究利用N端融合人免疫缺陷病毒反式激活因子（Human immunodeficiency virus t

【作者】

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胡广东高元鹏王静郑丽明张涌

【机构】

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西北农林科技大学动物医学院,西北农林科技大学农业部动物生物技术重点实验室

【出处】

：

农业生物技术学报

【发表日期】

：

2014年4期

【关键词】

：

piggyBac(PB)转座子转座酶原核表达人免疫缺陷病毒反式激活因子(TAT)穿膜肽 HEK 293细胞

【基金项目】

：

国家转基因重大项目专项(No.2013ZX08007-004);国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2011AA100303)

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为了增加piggyBac （PB）转座系统在转基因操作中安全性和减少PB转座系统的辅助质粒带来的副作用，本研究利用N端融合人免疫缺陷病毒反式激活因子（Human immunodeficiency virus transactivator, TAT）穿膜肽的原核表达PB转座酶替代辅助质粒在人肾胚细胞（HEK293细胞）介导PB转座的发生，同时建立一种由TAT介导的外源功能蛋白进入真核细胞的方法。构建了N端和C端分别融合TAT的PB转座酶原核表达载体（pET28A-Pbase 1，pET28A-Pba

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