【摘 要】
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为了在大肠杆菌中表达大肠杆菌丙酮酸脱氢酶,用PCR法从大肠杆菌总DNA中克隆了pdc基因,将其插入载体pGEX-KG后转化大肠杆菌BL21（DE3）,在IPTG的诱导下实现了表达。通过对表达条件
【机 构】
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华中师范大学生命科学学院,宜春学院医学院,华中师范大学化学学院
【基金项目】
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国家重点基础研究发展规划项目(2003CB114400);国家自然科学基金资助项目(20372023)
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为了在大肠杆菌中表达大肠杆菌丙酮酸脱氢酶,用PCR法从大肠杆菌总DNA中克隆了pdc基因,将其插入载体pGEX-KG后转化大肠杆菌BL21（DE3）,在IPTG的诱导下实现了表达。通过对表达条件的优化,在TB＋M9（1∶1）培养基中,33℃下使用终浓度0.5 g·L^-1的乳糖诱导4 h,重组大肠杆菌丙酮酸脱氢酶的表达量可占全菌蛋白的45%左右,比未优化前提高了约20%,同时大大降低了成本。
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