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探讨shRNA下调谷氨酰胺转运体ASCT2对结肠癌细胞Lovo和SW480生物学行为的影响。
方法利用Lipofectamine 2000介导ASCT2-shRNA的表达载体转染结肠癌细胞Lovo和SW480，通过反转录PCR和western blot分别检测转染后ASCT2 mRNA及蛋白的表达情况；分别应用MTT法和transwell法检测其结肠癌细胞增殖和侵袭能力；应用放射示踪法检测结肠癌细胞对谷氨酰胺的摄取情况。
结果shASCT2转染后，Lovo和SW480细胞中ASCT2 mRNA及蛋白水平均显著下调（P < 0.01）。shASCT2转染后，Lovo和SW480细胞增殖能力（A490）和细胞侵袭能力（透膜细胞数）均较对照组细胞显著减弱（均P < 0.01）；其中Lovo细胞中实验组和对照组的透膜细胞数分别为46.3 ± 5.9和197.7 ± 9.1，SW480细胞中实验组和对照组的透膜细胞数分别为29.7 ± 3.8和139.0 ± 9.5。放射示踪法检测显示，shASCT2转染后，Lovo和SW480细胞对谷氨酰胺的摄取受到显著抑制，其中，对Lovo细胞的抑制率为79.15%，对SW480的抑制率为67.22%，差异均有统计学意义（均P < 0.01）。
结论ASCT2在结肠癌中发挥癌基因的作用，其促进结肠癌进展的机制可能与谷氨酰胺代谢有关，有望成为肿瘤代谢治疗的重要靶点。