【摘 要】
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目的将EMA(Ethidium Monoazide Bromide)选择渗透性与PCR技术相结合,建立有效快速检测饮用水中3种食源性致病菌活菌EMA-PCR方法。方法以鼠伤寒沙门菌inv A、肠出血性大肠杆菌
【机 构】
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南京医科大学,江苏省昆山市疾病预防控制中心,江苏省苏州市疾病预防控制中心,
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目的将EMA(Ethidium Monoazide Bromide)选择渗透性与PCR技术相结合,建立有效快速检测饮用水中3种食源性致病菌活菌EMA-PCR方法。方法以鼠伤寒沙门菌inv A、肠出血性大肠杆菌O157:H7 rfb E、铜绿假单胞菌opr I基因为PCR检测靶基因,纯培养物提取模板进行PCR,进行EMA使用浓度及灵敏度试验。结果 EMA浓度不大于10μg/ml对活菌DNA扩增没有明显抑制,终浓度为1μg/ml EMA能有效抑制死菌扩增;对鼠伤寒沙门菌、肠出血性大肠杆菌O157:H7、铜绿假单胞菌的EMA-PCR灵敏度分别为1.2×104CFU/ml、2×105CFU/ml、3×104CFU/ml;用10μg/ml EMA处理饮用水水样,可同时检测出饮用水中含有的3种食源性致病菌活菌。结论 EMA-PCR方法可一次检测饮用水中3种食源性致病菌活菌,能避免PCR检测可能造成假阳性结果。
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