【摘 要】
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目的建立结肠癌细胞多药耐药模型LoVo/Adr并研究其耐药机制.方法采用阿霉素浓度递增法,建立人结肠癌细胞多药耐药模型LoVo/Adr,观察其生长规律;用MTT法鉴定耐药细胞株的耐药
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目的建立结肠癌细胞多药耐药模型LoVo/Adr并研究其耐药机制.方法采用阿霉素浓度递增法,建立人结肠癌细胞多药耐药模型LoVo/Adr,观察其生长规律;用MTT法鉴定耐药细胞株的耐药性;以流式细胞术检测其周围分布;用RT-PCR方法检测耐药相关基因mdr1、MRP、GST-π及TopoⅡmRNA水平在诱导耐药过程中的变化;采用免疫组化法检测P-gp的表达.结果LoVo/Adr细胞与LoVo细胞相比,生长缓慢,倍增时间延长,细胞形态较不规则,S期细胞减少,而G1、G2期增多,P-gp染色阳性.LoVo/Adr对阿霉素、长春新碱、丝裂霉素、环磷酰胺和5-FU耐药倍数分别是61倍、14倍、3倍、9倍和1倍.亲本LoVo细胞mdr1不表达,随着阿霉素诱导mdr1 mRNA水平逐渐增高,GST-πmRNA在诱导初期显著增高,但不随着对阿霉素耐受浓度增加而升高;ToopⅡmRNA水平一直无显著变化;未测到MRP的表达.结论耐药株LoVo/Adr是一个表达MDR表型的多药耐药模型,主要由mdr1和GST-π基因介导耐药,与TopoⅡ和MRP基因无关.
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