结核分枝杆菌Hsp65与IL-2融合蛋白稳定表达细胞系的建立

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：aiming6946s

【摘要】

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目的构建了表达结核分枝杆菌Hsp65与IL-2融合蛋白的真核表达载体；获得重组质粒稳定转染的P815细胞系。方法将Hsp65与IL-2基因分别克隆至真核表达载体pcDNA3．1．转化DH5α菌株感受

【作者】

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师长宏张海席丽王晓武王丽梅赵勇

【机构】

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第四军医大学实验动物研究中心,第四军医大学基础部微生物学教研室

【出处】

：

中国人兽共患病学报

【发表日期】

：

2008年8期

【关键词】

：

结核分枝杆菌真核表达热休克蛋白65 白细胞介素2 融合蛋白 Mycobacterium tuberculosis eukaryotic expression

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30400381）,陕西省自然科学基金项目（2006C218）

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目的构建了表达结核分枝杆菌Hsp65与IL-2融合蛋白的真核表达载体；获得重组质粒稳定转染的P815细胞系。方法将Hsp65与IL-2基因分别克隆至真核表达载体pcDNA3．1．转化DH5α菌株感受态细胞。获得阳性重组质粒Hsp65-IL-2-pcDNA3．1。在阳离子聚合物作用下，重组质粒转染与BALB／c遗传背景一致的P815（H-2^d）细胞。G418筛选抗性克隆，免疫荧光检测融合蛋白的表达。结果真核质粒转染的阳性克隆细胞．经RT—PCR检测到Hsp65与IL-2融合蛋白mRNA水平的表达，分别用抗

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