【摘 要】
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采用RTPCR方法从中国人肾癌细胞株中克隆到甲状旁腺素相关蛋白(Parathyroidhormnoerelatedprotein,PTHrP)cDNA,其核苷酸序列与国外发表资料相比,有6个核苷酸不同,其中仅92位密码子的不同导致氨基酸变异,即由脯氨酸变为丝氨酸。将克隆
【机 构】
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中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室
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采用RTPCR方法从中国人肾癌细胞株中克隆到甲状旁腺素相关蛋白(Parathyroidhormnoerelatedprotein,PTHrP)cDNA,其核苷酸序列与国外发表资料相比,有6个核苷酸不同,其中仅92位密码子的不同导致氨基酸变异,即由脯氨酸变为丝氨酸。将克隆的PTHrPcDNA插到原核表达载体pET3a的T7噬菌体启动子下游,转化大肠杆菌后得到高效表达,并经Westernblot和生物学活性检测对表达产物作了鉴定。
The cDNA of parathyroid hormone related protein (PTHrP) was cloned from Chinese human renal cell carcinoma cell line by RTPCR. The nucleotide sequence of the cDNA was 6 nucleotides different from that published in foreign countries. The difference in codon 92 results in a variation in amino acids, from proline to serine. The cloned PTHrPcDNA was inserted into the prokaryotic expression vector pET 3a downstream of the T7 phage promoter, transformed into E. coli after high expression, and the expression product was identified by Western blot and biological activity test.
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