目的 建立慢病毒介导稳定干扰SIRT2基因的人外周血白血病T细胞株(Jurkat)并检测其对细胞凋亡的影响.方法 构建2条针对人源SIRT2基因的shRNA(shSIRT2-1#,shSIRT2-2#),连接到慢病毒载体(pCDH-EF1-MCS-T2A-copGFP)并进行测序鉴定.将SIRT2 shRNA慢病毒载体和包装质粒一起转染到293T细胞中,然后收集病毒液,将病毒浓缩液浓缩后去感染人外周血白血病T细胞.采用嘌呤霉素筛选细胞株,进而去建立能够稳定表达SIRT2 shRNA的细胞株.通过蛋白质印迹法来检测SIRT2蛋白水平的表达变化情况,使用流式细胞术来检测细胞的凋亡变化情况.结果 琼脂糖凝胶电泳法鉴定经酶切后的重组质粒,结果显示片段大小约为500 bp,与SIRT2片段长度相符,SIRT2 shRNA慢病毒干扰载体构建成功.蛋白质印迹法检测SIRT2蛋白,与阴性对照组相比,shSIRT2-1#组和shSIRT2-2#组Jurkat细胞中SIRT2蛋白水平显著下调.流式细胞术结果显示,稳定敲低SIRT2蛋白的细胞早中期凋亡率为(20.77±0.66)％,较沉默敲除细胞明显增加,P=0.004.结论 成功建立了shRNA慢病毒载体介导的稳定敲低SIRT2的Jurkat细胞株,功能试验证实病毒介导的敲除SIRT2基因的Jurkat细胞的凋亡率增加,说明SIRT2基因具有抗凋亡作用,为进一步深入研究SIRT2蛋白生物学功能提供理论依据.