【摘 要】
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目的:建立重组人溶菌酶含量及纯度的反相高效液相色谱（RP-HPLC）检测方法。方法:采用Welch Ultimate XB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,含0.1%三氟乙酸和0.9%氯化钠的水溶液为流
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目的:建立重组人溶菌酶含量及纯度的反相高效液相色谱（RP-HPLC）检测方法。方法:采用Welch Ultimate XB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,含0.1%三氟乙酸和0.9%氯化钠的水溶液为流动相A;含0.1%三氟乙酸和0.9%氯化钠水溶液-乙腈（40∶60）为流动相B;检测波长280 nm,柱温32℃,流速1.0 mL·min-1,线性梯度洗脱。结果:本方法专属性良好;供试品48 h内稳定,RSD为0.51%;重复性RSD为0.46%,中间精密度不同工作日间的RSD为0.52%,不同实验员间的RSD为0.53%;定量下限200 ng、检测下限30 ng;在进样量10～60μg范围内,线性关系良好,r=0.999 9;平均回收率（n=9）99.7%,RSD为0.94%。测定3批重组人溶菌酶冻干粉含量分别为36.5%、32.8%和31.1%;纯度均大于98%。结论:方法学验证表明,该方法符合定量检测重组人溶菌酶含量和纯度的要求,适用于重组人溶菌酶的质量控制。
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