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目的：建立硅胶柱层析法分离川芎挥发油中的藁本内酯。方法：将川芎挥发油以石油醚稀释后上硅胶柱，用石油醚：乙酸乙酯（100：1）进行洗脱，将分离制得的藁本内酯采用光谱分析进行结构鉴定，并用气相色谱-质谱联合分析（GC-MS）面积归一化法进行纯度检查。结果：从川芎挥发油中分离得纯度≥98％的藁本内酯，可作为对照品使用。结论：本研究建立的硅胶柱层析法简单、方便，能从川芎挥发油中分离得纯度高的藁本内酯单体。