【摘 要】
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目的 :观测原代小鼠胰岛在小鼠肝脏脱细胞支架上的生长及功能,探讨组织工程学治疗糖尿病的新方法。方法 :运用灌注法制备结构完整的全肝脏脱细胞支架并检测,运用胶原酶P灌注
【机 构】
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南通大学附属医院普外科; 苏州大学附属第一医院普外科;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助(81471801)
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目的 :观测原代小鼠胰岛在小鼠肝脏脱细胞支架上的生长及功能,探讨组织工程学治疗糖尿病的新方法。方法 :运用灌注法制备结构完整的全肝脏脱细胞支架并检测,运用胶原酶P灌注消化法获取小鼠胰岛细胞并行结构和功能完整性分析;将分离纯化的原代小鼠胰岛经门静脉灌入全肝脏脱细胞支架,在三维培养体系培养后进行相关检测。结果:肝脏脱细胞支架检测未见细胞结构,胶原结构保存完整。支架内剩余DNA定量检测结果为(38±11)ng/mg ds DNA,生物相容性良好。双硫腙(dithizone,DTZ)染色胰岛呈现特异性猩红色,葡萄糖刺激实验提示在高糖组中培养的原代小鼠胰岛胰岛素分泌功能明显高于低糖组,差异具有统计学意义(P<0.01);将胰岛移植入肝脏脱细胞支架培养5 d后胰岛定植,且胰岛素基因表达显示脱细胞支架三维培养中胰岛素表达水平与平面培养相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:肝脏脱细胞支架三维培养体系中的胰岛细胞比传统平面培养具有更佳的细胞活力及更有效的胰岛素分泌功能。
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