【摘 要】
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利用重组Escherichia coliΔadd/ade(pBV03)和Saccharomyces cerevisiaeWSH2构建了一个生物合成谷胱甘肽(GSH)的种间耦合系统。在该耦合系统中,一方面,大肠杆菌腺苷脱氨酶和
【机 构】
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江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江南大学生物工程学院
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利用重组Escherichia coliΔadd/ade(pBV03)和Saccharomyces cerevisiaeWSH2构建了一个生物合成谷胱甘肽(GSH)的种间耦合系统。在该耦合系统中,一方面,大肠杆菌腺苷脱氨酶和腺嘌呤脱氨酶的缺失完全切断了E.coliΔadd/ade(pBV03)中不可逆转化腺苷(Ado)生成次黄嘌呤(Hx)的途径;另一方面,利用脯氨酸限制性培养降低了酿酒酵母WSH2中ADE的活性,进一步降低了耦合系统中从Ado到Hx的不可逆转化。以上两方面大大降低了耦合系统中从Ado到Hx的不可逆转化,从而保证更多的底物Ado被S.cerevisiaeWSH2用于再生ATP,最终耦合系统中ATP再生的效率大大提高。反应6 h后,该耦合系统GSH的合成量达到13.68mmol/L,为对照的5.14倍。
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