【摘 要】
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为获得耐高温的重组乳糖酶,PCR扩增激烈热球菌(Pyrococcus furious)乳糖酶基因、构建毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA/Lac并转化毕赤酵母X-33菌株。重组酵母转化子经甲醇诱导
【机 构】
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怀化学院生命科学系,中国科学院广州生物医药与健康研究院
【基金项目】
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国家自然科学基金青年基金项目(81300655)
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为获得耐高温的重组乳糖酶,PCR扩增激烈热球菌(Pyrococcus furious)乳糖酶基因、构建毕赤酵母分泌型表达载体pPICZαA/Lac并转化毕赤酵母X-33菌株。重组酵母转化子经甲醇诱导,重组嗜热乳糖酶实现了分泌表达并经蛋白印迹验证。纯化前上清液中乳糖酶总活力高达125U/mL,经镍亲合纯化得重组酶,SDS-PAGE显示其纯度在95%以上,比活力1800U/mg,该酶最适温度在105℃左右且热稳定性好,具有很强的水解乳糖能力。
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