【摘 要】
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目的:探讨miR-100对胰腺癌细胞在体外侵袭和迁徙能力的影响及其机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶连反应(qRT-PCR)检测miR-100在6株人胰腺癌细胞系及1株人正常胰腺上皮细胞
【机 构】
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贵州医科大学附院肝胆外科,贵州医科大学肝胆胰脾重点实验室,武汉大学人民医院,湖北省消化病学研究所
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目的:探讨miR-100对胰腺癌细胞在体外侵袭和迁徙能力的影响及其机制。方法:采用实时荧光定量聚合酶连反应(qRT-PCR)检测miR-100在6株人胰腺癌细胞系及1株人正常胰腺上皮细胞系中的表达,选取表达差异较明显的PANC-1和MIA PaCa-2细胞系进行后续实验;针对miR-100设计miR-100 mimic和空载体(NC),并转染上述两株细胞系中,用PCR检测转染效率;Transwell实验及划痕实验检测miR-100对胰腺癌细胞侵袭转移能力的影响,免疫荧光检测miR-100对胰腺癌细胞骨架的影响,Western blot检测转染细胞后FZD-8的表达。结果:PCR实验显示miR-100在胰腺癌细胞系中低表达,在正常胰腺上皮细胞系中高表达,所设计的miR-100 mimic可以有效地升高PANC-1和MIA PaCa-2细胞系中miR-100的表达;Transwell实验及划痕实验显示转染miR-100之后,能有效的抑制胰腺癌细胞的侵袭及迁移能力(P<0.05);免疫荧光显示转染miR-100后,F-肌动蛋白(F-actin)减少;Western blot结果显示,转染miR-100后,FZD-8的表达减少,胰腺癌细胞的侵袭转移能力明显降低。结论:上调miR-100后,胰腺癌细胞可能通过下调FZD-8的表达来抑制其侵袭转移的能力,提示miR-100有望成为胰腺癌治疗的潜在靶点。
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