【摘 要】
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目的 探讨DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)在人肝癌细胞株(SMMC7721)中调节细胞周期素(Cyclin) D1基因表达的机制.方法 用DNMT3b的小干扰RNA(siRNA)表达载体转染SMMC7721细胞抑制DNMT3b的表达;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测微小RNA(miR)-145、Cyclin D1 mRNA表达的变化;用甲基化特异性PCR (MSP)技术检测miR-
【机 构】
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目的 探讨DNA甲基转移酶3b(DNMT3b)在人肝癌细胞株(SMMC7721)中调节细胞周期素(Cyclin) D1基因表达的机制.方法 用DNMT3b的小干扰RNA(siRNA)表达载体转染SMMC7721细胞抑制DNMT3b的表达;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测微小RNA(miR)-145、Cyclin D1 mRNA表达的变化;用甲基化特异性PCR (MSP)技术检测miR-145基因启动子区甲基化状态的变化.结果 siRNA转染肝癌细胞的效率可达90％以上,DNMT3b成功被抑制;两组中miR-145基因启动子区甲基化水平的差异无统计学意义(P＞0.05);实验组miR-145表达水平明显高于对照组(P＜0.01),但Cylin D1 mRNA表达水平的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DNMT3b可以通过miR-145调节Cyclin D1的表达,从而影响细胞周期,进而引起肝癌细胞的大量凋亡。
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