【摘 要】
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目的 探讨人痉挛性截瘫蛋白21 (SPG21)对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响,并探讨其调节机制.方法 将HBV感染性克隆pHBVl.3及其启动子pHBV-Luc分别转染HepG2细胞,加入不同浓度的S
【机 构】
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浙江省 宁波市第二医院宁波市传染病医院
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目的 探讨人痉挛性截瘫蛋白21 (SPG21)对乙型肝炎病毒(HBV)复制的影响,并探讨其调节机制.方法 将HBV感染性克隆pHBVl.3及其启动子pHBV-Luc分别转染HepG2细胞,加入不同浓度的SPG21蛋白,采用酶联免疫吸附法检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg含量;RTPCR和Western blot法检测HepG2细胞内HBV核心蛋白mRNA和蛋白表达;荧光定量PCR法检测细胞闭合环状DNA (cccDNA)的水平;采用Luminometer荧光检测仪分析HBV启动子活性的变化.实验数据用均数±标准差((x)±s)表示,组间比较采用t检验.结果 SPG21能够上调细胞上清液中HBsAg和HBeAg的含量,同时能够促进细胞内HBV核心蛋白的表达和HBV cccDNA的产生,并上调HBV启动子活性,其调节作用呈剂量依赖效应;与对照组比较,加入50μg/ml,100μg/ml,200μg/ml SPG21蛋白48h后,HBV启动子上调倍数分别为1.63、3.09和4.66(P＜0.05). 结论 SPG21能够促进HBV在HepG2细胞中的复制.
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