【摘 要】
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miR-340能够促进癌细胞的增殖和侵袭,但是在结直肠癌中miR-340如何调控癌症的发生与发展鲜有报道.本研究探究miR-340在结直肠癌细胞中的生物学功能和靶基因调控机制.首先通过
【机 构】
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内蒙古医科大学附属医院肿瘤内科,呼和浩特010050;内蒙古医科大学第一临床医学院,呼和浩特010050
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miR-340能够促进癌细胞的增殖和侵袭,但是在结直肠癌中miR-340如何调控癌症的发生与发展鲜有报道.本研究探究miR-340在结直肠癌细胞中的生物学功能和靶基因调控机制.首先通过RT-qPCR检测不同的结直肠癌细胞株中miR-340的表达水平,再利用过表达和抑制miR-340,分别转染COLO-205细胞,以CCK-8检测细胞的增殖能力,Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力,流式细胞技术检测细胞的凋亡和细胞周期分布;最后通过生物信息学预测miR-340的靶基因,荧光素酶报告基因及Western印迹分析进行验证.结果显示,miR-340在COLO-205细胞中低表达,与对照组比较,细胞的增殖、迁移和侵袭在过表达miR-340转染组显著受到抑制,在抑制miR-340组中却被促进(P＜0.01).流式细胞检测结果显示,过表达miR-340转染组细胞凋亡比例显著升高,而抑制miR-340组中凋亡比例却降低(P＜0.01).过表达miR-340转染组细胞生物信息学分析结果显示,葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD,GRP78)的3'UTR 上有 miR-340-5p 的结合位点,并且荧光素酶活性在转染过表达miR-340组中显著降低(P＜0.01);Western印迹结果同样表明,过表达miR-340能够抑制GRP78的表达,而抑制miR-340,GRP78的表达抑制解除.综上所述,miR-340能够直接靶向GRP78来促进COLO-205细胞的凋亡,并抑制其增殖、迁移和侵袭.
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