【摘 要】
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目的:探索血小板铺展的主要影响因素，为相关疾病研究奠定基础。方法:体外分离C57BL/6J小鼠的血小板（2×10~7/ml）,室温静置1-2 h后，将血小板样本均匀的铺在纤维蛋白原包被的载玻片上，利用鬼笔环肽标记骨架蛋白F-actin,封片后通过荧光共聚焦显微镜观察血小板铺展状态，分析不同浓度的纤维蛋白原和激动剂等因素对血小板铺展的影响。实验中纤维蛋白原浓度为10、30和100μg/ml,激动剂为
【机 构】
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苏州大学医学部江苏省血液研究所苏州大学第一附属医院卫生部血栓与止血重点实验室放射医学与防护国家重点实验室血液学协同创新中心
【基金项目】
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国家自然科学基金（82070121）；
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目的:探索血小板铺展的主要影响因素，为相关疾病研究奠定基础。方法:体外分离C57BL/6J小鼠的血小板（2×10~7/ml）,室温静置1-2 h后，将血小板样本均匀的铺在纤维蛋白原包被的载玻片上，利用鬼笔环肽标记骨架蛋白F-actin,封片后通过荧光共聚焦显微镜观察血小板铺展状态，分析不同浓度的纤维蛋白原和激动剂等因素对血小板铺展的影响。实验中纤维蛋白原浓度为10、30和100μg/ml,激动剂为凝血酶（0.01、0.05和0.1 U/ml）、ADP（5、10和20μmol/L）和U46619（0.125、0.25和0.5μmol/L）。若激动剂处理后的血小板呈树突状并且铺展率较高，则说明血小板铺展的方法构建成功。结果:与10和100μg/ml的纤维蛋白原组相比，在包被了30μg/ml纤维蛋白原的载玻片上粘附的血小板数目最优；另外，在凝血酶、ADP和U46619的刺激下，血小板铺展与刺激剂浓度呈正相关（ADP:r=0.925, U46619:r=0.937）。结论:血小板的铺展受到很多因素的影响，30μg/ml的纤维蛋白原、0.1 U/ml的凝血酶、20μmol/L的ADP和0.5μmol/L的U46619可成功诱导2×10~7/ml血小板的铺展。
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