目的:为研制具有养阴润肺止咳功效,可用于治疗急性放射性肺炎的沙百润肺颗粒中药新药,进行沙百润肺颗粒制备工艺研究,确定提取工艺路线,优选提取工艺参数,考察成型工艺条件,为研发新药提供临床前工艺研究资料。方法:1.提取工艺路线的确定:经查阅处方药味主要成分的药理作用及其理化性质,结合临床应用与功能主治的特点,初选贵细药川贝母生粉入药,其余药味分别水提、醇提或部分醇提,拟定四条工艺路线:工艺路线一(简称工艺一):川贝母生粉入药,其余药味水煎煮;工艺路线二(简称工艺二):川贝母生粉入药,北沙参、重楼、枸骨叶、牡丹皮醇提,其余药味水煎煮;工艺路线三(简称工艺三):川贝母生粉入药,重楼、枸骨叶、牡丹皮醇提取,其余药味水煎煮;工艺路线四(简称工艺四):川贝母、1/3北沙参、1/3杏仁、1/3桔梗生粉入药,牡丹皮、重楼、枸骨叶、2/3北沙参、2/3桔梗醇提,其余药味水煎煮。采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间-质谱(UPLC-QTOF-MS)技术结合主成分分析正负离子模式和干膏得率,以单次大剂量照射建立急性放射性肺炎小鼠模型、设地塞米松为阳性对照,观察给药2周后小鼠急性放射性肺损病理组织变化,对不同工艺路线对急性放射性肺损伤药效学作用、化学成分和干膏得率的比较,结合临床和生产实际综合评价,确定提取工艺路线。2.提取条件优选:按照确定的工艺路线,拟对影响提取效果较大的加水倍量、浸泡、提取时间和提取次数考察。通过考察药材吸水率,药材浸泡时间,选定浸泡时间范围;采用处方中主要成分知母皂苷BⅡ、芒果苷、总皂苷含量测定作为考察指标,分别对浸泡0、30min、60min、90min以及提取时间15min、30min、60min的单因素考察,确定提取时间范围;进而采用正交设计,选择对提取效果影响较大的加水量8、10、12倍,提取时间30min、60min、90min,提取次数1、2、3次等三因素、三水平,优选最佳提取条件。3.浓缩条件考察:以知母皂苷BⅡ和芒果苷含量为考察指标,比较提取液在常压和减压两种方式下对浓缩效果的影响;考察清膏相对密度,确定清膏浓缩方式,相对密度等条件。4.成型条件参数考察:考察制粒方法,将清膏中加入不同辅料制粒,通过评价颗粒性状、制粒的难易程度、溶化性、口感等,确定最佳辅料用量比;以知母皂苷BⅡ和芒果苷含量为考察指标,比较颗粒干燥温度,确定颗粒的干燥条件。按照上述选定的浓缩、制粒、干燥条件制备颗粒,测定颗粒的休止角、堆密度、吸湿百分率和临界相对湿度,考察成型条件。结果:1.提取工艺路线的确定(1)不同工艺路线提取物干膏率的比较:工艺一、二、三、四干膏得率分别为31.1%、35.2%、37.6%、45.2%。(2)不同工艺路线提取物化学成分差异分析:根据主成分得分图、偏最小二乘法判别分析评分图与模型验证图实验结果分析工艺一与工艺二、三、四组之间存在化学成分的差异。(3)不同工艺路线提取物提取物对急性放射性肺炎小鼠的作用:小鼠一般征象:模型对照组小鼠出现活动、摄食饮水量减少,精神萎靡,胸背部皮毛脱落,并伴有死亡,地塞米松阳性对照组、沙百润肺颗粒工艺一、二、三、四组小鼠较模型对照组活动、摄食饮水量、精神较正常,背部皮毛脱落较少,伴有小鼠死亡。急性小鼠放射性肺炎病理学评分模型对照组显著高于空白对照组(P<0.05),工艺一组、工艺二组均显著低于模型对照组(P<0.01、P<0.05),工艺三组、工艺四组与模型对照组比较差异均无统计学意义。结合临床应用、生产成本,综合评价选定工艺路线一,即十四味药材水提取,川贝母生粉入药。2.提取条件确定(1)药材吸水率选定方中药材在60min的吸水量为药材量的139%,此时的曲线趋于平缓,表明药材吸水量基本已经达到饱和,初步拟定药物浸泡60min。(2)浸泡时间的考察药物浸泡时间0、15min、30min、60min,不同浸泡时间知母皂苷、芒果苷、总皂苷含量无明显变化,表明本处方药味无需浸泡。(3)煎煮时间单因素考察同等条件下比较单因素煎煮时间(15min、30min、60min)的影响,根据综合评分情况选择煎煮时间为60min。(4)正交试验分析,得到最佳提取工艺条件为:10倍量水,提取时间60min,提取三次。经提取工艺验证,显示优选的提取参数合理、稳定、可控。3.浓缩条件确定相比常压浓缩,减压浓缩能够防止或减少热敏性物质的分解,提高生产效率,故在浓缩药液时选择减压浓缩;减压条件为(0.08Mpa~0.1Mpa),温度(65℃)下浓缩至相对密度为1.09~1.10时,清膏呈粘稠状态且流动性好,制得的清膏适于制粒。4.成型条件参数确定选择蔗糖:糊精为辅料,清膏与蔗糖、糊精配比为1:2:0.5,制得的颗粒外观较好、口感佳,经干燥温度考察,在80℃下干燥时知母皂苷BⅡ、芒果苷的含量最高,确定最佳的颗粒干燥温度为80℃干燥。测定制得颗粒的休止角,结果显示颗粒流动性良好,考察吸湿百分率和临界相对湿度,结果提示储存颗粒需在湿度为65%以下的环境中。结论:确定川贝母生粉入药,其余药味水煎煮的工艺路线;优选出加水倍量、煎煮次数、煎煮时间的最佳提取条件;选定浓缩方式以及适宜制粒的清膏相对密度范围,选择辅料以及与清膏的配比、干燥温度等成形工艺参数,制得颗粒指标成分含量较高,减轻急性放射性肺损伤炎症反应药效学作用较好,检查项符合现行版药典下颗粒剂的通则规定,制备工艺科学合理、简便可行、操作可控。