【摘 要】
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目的:探讨TNFAIP8(TIPE)在小鼠正常肠道组织和结肠炎症组织中的表达及意义.方法:选择8～10周龄的C57BL/6野生型(WT)雄性小鼠3只并取其结肠组织,进行研磨破碎后用TRIzol试剂提取
【机 构】
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河南省免疫与靶向药物重点实验室,新乡医学院医学检验学院,新乡 453003;河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心,新乡,453003;河南省免疫与靶向药物重点实验室,新乡,453003
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目的:探讨TNFAIP8(TIPE)在小鼠正常肠道组织和结肠炎症组织中的表达及意义.方法:选择8～10周龄的C57BL/6野生型(WT)雄性小鼠3只并取其结肠组织,进行研磨破碎后用TRIzol试剂提取结肠总RNA,聚合酶链反应(PCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测结肠中TIPE家族成员mRNA表达情况.选择8～10周龄的WT雄性小鼠5只,分离其十二指肠、空肠、回肠和结肠的上皮细胞后,提取细胞总蛋白和总RNA,Western blot和qPCR检测十二指肠、空肠、回肠和结肠上皮细胞中TIPE蛋白及mRNA的表达.选择8～10周龄的WT雄性小鼠18只,分成6组,每组3只,用含3.0％DSS的饮用水饲养小鼠,在不同的时间点处理小鼠并提取其结肠上皮细胞,qPCR检测DSS诱导肠炎后结肠上皮细胞中TIPE的表达变化.选择8～10周龄的WT雄性小鼠9只,分成3组,每组3只,为了检测感染效率,将小鼠进食8 h后,然后用2×109 CFU的Citrobacter rodentium给小鼠灌胃,在不同的时间点处理小鼠并提取其结肠上皮细胞,qPCR检测Citrobacter rodentium诱导肠炎后结肠上皮细胞中TIPE的表达变化.结果:在WT小鼠结肠组织中,TIPE家族成员都有相应的表达,但TIPE在结肠组织中的表达最高.和十二指肠、空肠和回肠相比,TIPE在结肠上皮细胞中的表达最高.DSS诱导肠炎后,TIPE在结肠上皮细胞中的表达上调(P<0.05).Citrobacter rodentium诱导肠炎后,TIPE在结肠上皮细胞中的表达上调(P<0.05).结论:与其他TIPE家族成员相比,TIPE在小鼠结肠组织中和结肠上皮细胞中高表达.DSS及Citrobacter rodentium诱导肠炎后,TIPE在结肠上皮细胞中表达上调.TIPE在肠道组织中特殊的表达方式提示TIPE可能在肠道免疫稳态和肠道炎症过程中发挥一定的作用.
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