草莓果实特异表达基因annfaf在E.coli中的表达及抗血清的制备

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将草莓(Fragaria ananassa Duch.)果实中特异表达的膜联蛋白基因annfaf的cDNA连接重组到pET-30a质粒中,构建了融合和非融合蛋白表达载体.annfaf基因转化大肠杆菌(E.coli)后以包含体形式得到了高效表达,同时研究了annfaf基因表达的影响因素.实验结果表明,最佳培养温度是37℃,培养时间为4 h,当培养液中加入利福霉素时可明显提高表达量中目的蛋白的含量.SDS-PAGE检测表明该蛋白分子量为35 kD,与目的蛋白相同.以表达的蛋白作抗原免疫家兔,制备了抗Annfa
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