【摘 要】
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目的:建立一种快速、灵敏的速度/爆发力相关基因——ACTN3-C1747T多态性速测方法。方法:Chelex法提取外周静脉血基因组DNA;采用等位基因特异性(allele-specific,AS)PCR法扩增
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目的:建立一种快速、灵敏的速度/爆发力相关基因——ACTN3-C1747T多态性速测方法。方法:Chelex法提取外周静脉血基因组DNA;采用等位基因特异性(allele-specific,AS)PCR法扩增目的基因,在AS引物3′端第2位或第3位引入错配碱基改进特异性;筛选AS多态引物,优化内参引物、多态引物的Tm值,引物浓度比例,PCR循环数等一系列扩增条件;PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分析ACTN3-C1747T基因型。结果:AS-PCR可检测ACTN3-C1747T基因多态性,引入3′端第二个错配碱基可提高检测特异性,优化扩增条件更易于基因分型判断,PCR产物琼脂糖凝胶分型与DNA测序结果完全一致。结论:建立和优化的AS-PCR方法适用于快速检测ACTN3-C17基因多态性。
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