抗血小板糖蛋白单克隆抗体的纯化及生物活性鉴定

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原核表达重组质粒p3MH/P140-κFd,在E.coliXLI-Blue菌中获得了成功表达,利用重组蛋白中的6个组氨酸(His)组成的“标签”进行亲和层析,对表达产物进行纯化。SDS-PAGE蛋白电泳和Western blot的检测结果证明,纯化得到的分子量约47kD蛋白是鼠源性的Fab抗体,ELISA检测结果证明,P140Fab抗体与人血小板能特异性结合。体外二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集抑制试验证明,P140Fab抗体对血小板的聚集有抑制作用,并且具有剂量抑制效应,IC50的平均值为16.85
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