通过检测儿童肺动脉高压(PAH)患者外周血诱导型调节性T细胞35(iTr35)细胞比例和白细胞介素(IL)-35水平，分析IL-35对血管内皮细胞血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)活化的抑制作用，探讨iTr35细胞在儿童PAH疾病过程中的作用。
方法收集先天性心脏病(CHD)合并PAH患儿30例、CHD无PAH 22例和30例年龄、性别匹配的健康对照者(HC)外周血各3 mL；流式细胞术检测外周血iTr35细胞比例；Luminex液相芯片检测血清IL-35和可溶性VCAM-1(sVCAM-1)水平；体外培养人肺动脉内皮细胞(HPAECs)，分为空白对照组、肿瘤坏死因子(TNF)-α刺激组和IL-35＋TNF-α刺激组，通过流式细胞术、Western blot检测VCAM-1和核因子(NF)-κB P65蛋白水平，荧光显微镜观察单个核细胞和内皮细胞的黏附。
结果与CHD无PAH组相比，CHD合并PAH患儿组外周血iTr35细胞比例[0.86(0.45～1.63)%比1.14(0.46～2.11)%](H＝20.52，P<0.05)和血清IL-35水平[2.43(1.76～2.85) μg/L比3.17(2.92～5.66) μg/L](H＝119.56，P<0.05)显著降低、sVCAM-1水平[923.1(892.6～1 118.7) μg/L比776.1(743.5～932.3) μg/L ]显著升高(H＝65.65，P<0.05)，差异均有统计学意义；且PAH患者血清IL-35与sVCAM-1水平呈负相关(r＝－0.374，P＝0.042)。体外培养HPAECs与TNF-α组相比，IL-35＋TNF-α刺激组内皮细胞VCAM-1阳性率[(2.07±0.82)%比(5.83±1.34)%]显著降低，差异有统计学意义(F＝1 197.18，P<0.05)；与TNF-α组比较，IL-35＋TNF-α组内皮细胞NF-κB蛋白表达显著降低，单个核细胞与内皮细胞的黏附显著减少，差异均有统计学意义(F＝212.04、2 533.51，均P<0.05)。
结论儿童PAH患者外周血iTr35细胞比例及血清IL-35水平降低，体外实验表明IL-35可通过抑制血管内皮细胞VCAM-1表达，减少单个核细胞的黏附。