【摘 要】
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目的:既往研究发现,趋化因子CCL20在银屑病、白癜风等在内的多种自身免疫性皮肤疾病的病理过程中扮演了重要的角色,同时病毒感染也被认为是自身免疫性疾病的重要参与者.皮肤
【机 构】
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第四军医大学西京皮肤医院 陕西西安710032
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目的:既往研究发现,趋化因子CCL20在银屑病、白癜风等在内的多种自身免疫性皮肤疾病的病理过程中扮演了重要的角色,同时病毒感染也被认为是自身免疫性疾病的重要参与者.皮肤组织是机体抵御外界病原体的第一道屏障,其中角质形成细胞被认为在启动免疫中发挥了关键的作用.视黄酸诱导基因蛋白I(RIG-Ⅰ)是固有免疫模式识别受体家族的重要成员,其能够被病毒复制的中间产物激活.然而,病毒感染是否会通过RIG-Ⅰ信号通路影响角质形成细胞中CCL20的表达,进而参与自身免疫性皮肤疾病的病理过程仍不清楚.本文使用聚肌胞苷酸(Poly(I∶C))来体外模拟病毒感染,探究病毒感染对皮肤角质形成细胞CCL20表达的影响,并且通过小干扰RNA沉默关键分子来探究相应的分子机制.方法:首先,体外细胞实验使用Poly(I∶C)刺激角质形成细胞系HaCaT,通过Western-blot实验和qRT-PCR实验探究Poly(I∶C)对HaCat中RIG-Ⅰ表达的影响;接下来,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)以及酶联免疫吸附测定实验(ELISA)检测Poly(I∶C)对角质形成细胞CCL20分泌的影响;线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)在RIG-Ⅰ的下游发挥着重要作用,我们通过小干扰RNA(si-RNA)阻断RIG-Ⅰ-MAVS-NF-κB信号通路关键分子,探究Poly(I∶C)诱导角质形成细胞CCL20表达升高的分子机制.结果:Poly(I∶C)能够明显促进角质形成细胞中RIG-Ⅰ的表达及CCL20的表达和分泌;Poly(I∶C)诱导角质形成细胞CCL20分泌是由RIG-Ⅰ-MAVS-NF-κB信号通路介导的.结论:Poly(I∶C)模拟病毒感染能够通过RIG-Ⅰ-MAVS-NF-κB信号通路介导CCL20表达增加,进而参与自身免疫性皮肤疾病的病理过程.
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