【摘 要】
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目的 探讨人脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）条件培养基（conditioned medium,CM）对改善皮肤衰老表型的影响及可能存在的作用机制。方法 制备ADSCs的CM，经皮下注射到皮肤衰老裸鼠模型或应用于H2O2处理的成纤维细胞。采用Masson胶原染色和Weigert弹力纤维染色，以及抗Ki-67和α-SMA的免疫
【机 构】
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中国科学院苏州生物医学工程技术研究所医学检验室
【基金项目】
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姑苏重大创新团队（ZXT2019007）； 中科院战略先导A（XDA16020807）； 天津自然科学基金（17JCYBJC43400）；
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目的 探讨人脂肪间充质干细胞（adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSCs）条件培养基（conditioned medium,CM）对改善皮肤衰老表型的影响及可能存在的作用机制。方法 制备ADSCs的CM，经皮下注射到皮肤衰老裸鼠模型或应用于H2O2处理的成纤维细胞。采用Masson胶原染色和Weigert弹力纤维染色，以及抗Ki-67和α-SMA的免疫荧光染色观察皮肤衰老表型的改善。细胞模型中，采用CCK-8法、SA-β-gal染色、细胞SOD活性以及乙酰化酶1（sirtuin1,SIRT1）、I型胶原（collagen type I,COL-1）、Ⅲ型胶原（collagen typeⅢ，COL-3）的mRNA水平等评价CM对细胞氧化应激的改善作用。结果 CM促进衰老皮肤组织中胶原蛋白的合成和弹力纤维的连续性；此外，CM通过上调ki67和α-SMA的表达水平显著促进细胞新生和血管重建。在H2O2处理的成纤维细胞模型中，CM显著提高了细胞增殖活性，SA-β-gal阳性染色率降低，ROS含量降低。同时，CM可显著增加H2O2处理的成纤维细胞中SOD活性，上调SIRT1和COL-1基因表达，并下调COL-3基因水平。结论 CM可以通过减少细胞内氧化应激、提高细胞增殖活性、促进成纤维细胞中胶原蛋白合成来改善皮肤的衰老表型。
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