【摘 要】
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为寻找一种适合精子蛋白提取的裂解方法,运用不同的裂解液、裂解时间和裂解方法,分别对相同数量的精子进行总蛋白的提取,BCA法测蛋白含量,考马斯亮蓝染色检测蛋白丰度和质量,
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81771586,项目主持人葛红山),泰州人民医院院级科研基金项目(ZL201813,项目主持人:郭润发).
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为寻找一种适合精子蛋白提取的裂解方法,运用不同的裂解液、裂解时间和裂解方法,分别对相同数量的精子进行总蛋白的提取,BCA法测蛋白含量,考马斯亮蓝染色检测蛋白丰度和质量,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对蛋白进行分离,免疫印迹法检测LonP1和β-actin抗体蛋白表达以验证裂解液的裂解效果.结果表明,精子蛋白提取时使用1%SDS裂解液,在尽可能短时间进行超声后煮沸,可以提取到最大限度的高浓度、高质量的精子蛋白,这无疑为后续研究精卵作用机制、受精机理的最终探明奠定了坚实的基础。
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