HBV HBx基因荧光真核表达质粒的构建及其运用于HBV复制机制的初步研究

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liq123456

【摘要】

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目的构建能够表达HBx蛋白的绿色增强荧光蛋白-HBx（pEGFP-N1-HBx）真核表达质粒，并探讨HBx蛋白对乙型肝炎病毒（HBV）复制的影响。方法以HBVDimer为模板，PCR法扩增HBx基因，PCR产物测序分

【作者】

：

杨凯管世鹤孙蓓蓓潘颖吴园园王爱华

【机构】

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安徽医科大学第二附属医院检验科

【出处】

：

安徽医科大学学报

【发表日期】

：

2013年11期

【关键词】

：

乙型肝炎病毒 HBX蛋白质粒复制 hepatitis B virus HBx protein plasmid replication

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目的构建能够表达HBx蛋白的绿色增强荧光蛋白-HBx（pEGFP-N1-HBx）真核表达质粒，并探讨HBx蛋白对乙型肝炎病毒（HBV）复制的影响。方法以HBVDimer为模板，PCR法扩增HBx基因，PCR产物测序分析正确后克隆至真核表达载体pEGFP-N1，命名为pEGFP—N1-HBx。将该质粒转染肝胚瘤细胞株HepG2，以RT-PCR法及荧光显微镜观察其表达情况，再通过基因共转染等技术研究HBx蛋白对HBV复制的影响。结果酶切鉴定和序列分析证实构建质粒含HBx基因，RT-PCR法检测和荧光显微镜观察

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