【摘 要】
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目的：利用原核表达系统表达人肝脏凝血因子Ⅺ（ coagulation factor Ⅺ， F11）蛋白，并制备F11的兔多克隆抗体。方法从cDNA文库中筛选并扩增F11基因，将其分别与带有HIS标签的pET-32a及
【机 构】
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哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室
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目的：利用原核表达系统表达人肝脏凝血因子Ⅺ（ coagulation factor Ⅺ， F11）蛋白，并制备F11的兔多克隆抗体。方法从cDNA文库中筛选并扩增F11基因，将其分别与带有HIS标签的pET-32a及GST标签pGEX-4 T-1载体连接，获得表达质粒，将表达质粒转入BL21菌中表达F11融合蛋白（分别含有HIS、GST-Tag），通过SDS-PAGE进行鉴定。获得的F11融合蛋白经纯化后作为免疫原及检测原，制备兔多克隆抗体，Western blot分析获得的兔多克隆抗体的特异性。结果成功构建pET-32a-F11、pGEX-4t-1-F11表达质粒，获得两种标签的融合蛋白。将重组蛋白纯化后作为免疫原免疫兔，取得了能与重组蛋白特异性结合的兔血清。结论成功制备了F11重组蛋白及F11兔多克隆抗体，为进一步研发F11诊断试剂打下了基础。
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