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目的 构建表达超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素(SEA)基因的由前列腺特异性抗原(PSA)启动子及端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子双调控的特异性增殖溶瘤腺病毒SG504-SEA.方法 从前列腺癌组织基因组DNA中获得522 bp大小的PSA启动子序列,将PSA启动子克隆到由hTERT启动子调控的特异性增殖溶瘤腺病毒载体SG502中.得到靶向前列腺癌细胞的双调控溶瘤腺病毒载体SG504.将已构建好的含有771 bp大小SEA基因片段的病毒骨架质粒PPE3-cdb-SEA与SG504用Lipofectamine 2000共转染至293细胞.共转染后9～14 d出现病毒空斑,经过3次病毒空斑纯化,经鉴定正确的腺病毒命名为SG504.SEA,即携带SEA基因的双调控靶向前列腺癌的特异性溶瘤腺病毒.结果 经聚合酶链反应(PCR)及酶切鉴定,SEA基因成功克隆到病毒载体中,可以表达SEA基因,且病毒滴度为2.0×10~(10)pfu/ml.结论 成功构建表达超抗原SEA基因的双调控选择增殖型溶瘤腺病毒SG504-SEA。