【摘 要】
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目的 探讨白细胞介素-35(IL-35)基因修饰小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的可行性,并通过体内和体外实验评价其诱导调节性T细胞(Tregs)增殖的能力.方法 体外培养的小鼠BMSCs经过鉴定后,采用脂质体转染IL-35表达质粒,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养上清中IL-35含量,评价IL-35-MSCs分泌IL-35的能力.采用流式细胞方法检测淋巴细胞亚群的变化评价IL-35
【机 构】
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目的 探讨白细胞介素-35(IL-35)基因修饰小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的可行性,并通过体内和体外实验评价其诱导调节性T细胞(Tregs)增殖的能力.方法 体外培养的小鼠BMSCs经过鉴定后,采用脂质体转染IL-35表达质粒,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养上清中IL-35含量,评价IL-35-MSCs分泌IL-35的能力.采用流式细胞方法检测淋巴细胞亚群的变化评价IL-35-MSCs体外混合淋巴细胞培养和静脉注射后诱导Tregs增殖的能力.结果 利用全骨髓贴壁法可成功获得小鼠BMSCs,IL-35表达质粒转染后能表达具有生物活性的IL-35.接受静脉注射IL-35-MSCs组小鼠外周CD4+ CD25+ Tregs的比例为(5.24±0.61)％,明显高于注射转染对照质粒的MSCs组的(4.21±0.64)％和单纯MSCs组的(4.32±0.76)％,差异有统计学意义(P＜0.01),而后两者之间差异无统计学意义(P＞0.05).IL-35-MSCs静脉注射组小鼠脾脏淋巴细胞在单向淋巴细胞混合培养中CD4+T淋巴细胞和CD4+ CD25+ Tregs比例分别为(14.47±3.86)％、(4.35±0.57)％,而注射转染对照质粒的MSCs组分别为(20.89±2.32)％、(3.29±0.78)％,单纯MSCs组分别为(18.81±2.84)％、(3.43±1.02)％,差异有统计学意义(P＜0.05)而后两者之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 IL-35基因修饰的MSCs能促进CD4+ CD25+ Tregs增殖,其作用明显强于转染对照质粒和未转染的MSCs.IL-35和BMSCs发挥协同作用,放大各自的免疫调节和免疫抑制功能。
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