探讨β羟丁酸对阿尔茨海默病(AD)模型细胞神经营养因子受体p75(p75NTR)的调控及其机制。
方法以终浓度为5 mmol/L β羟丁酸对体外培养SH-SY5Y细胞预处理，再加入Aβ(终浓度为10、20、40、80 μmol/L)，同时设立对照组和单纯Aβ处理组，24 h后收集细胞，采用MTT法测定各组细胞活力。其次，将培养的细胞分为4组，单纯β羟丁酸组和β羟丁酸干预组细胞以终浓度为5 mmol/L β羟丁酸预处理，再向Aβ处理组和β羟丁酸干预组细胞加入终浓度为20 μmol/L Aβ，对照组仅加入培养液，6 h、24 h后收集细胞，以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测各组细胞中神经营养因子受体p75(p75NTR)、组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)、HDAC2 mRNA及其蛋白表达水平以及p65蛋白表达水平。最后，以小干扰RNA(siRNA)沉默HDAC1/2，分析细胞p75NTR mRNA及蛋白表达水平。
结果40、80 μmmol/L Aβ处理组细胞活力低于对照组(均P<0.01)，β羟丁酸干预组细胞活力高于Aβ处理组(P<0.01)。与对照组相比，6 h、24 h单纯β羟丁酸组细胞p75NTR mRNA及蛋白、p65蛋白表达水平升高(P<0.05)，Aβ处理组细胞p75NTR mRNA及蛋白、p65蛋白表达水平降低(P<0.01)，6 h单纯β羟丁酸组细胞HDAC1/2 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05)，6 h、24 h Aβ处理组细胞HDAC1/2 mRNA及蛋白表达水平升高(均P<0.01)；与Aβ处理组相比，6 h、24 h β羟丁酸干预组细胞p75NTR mRNA及蛋白表达水平、p65蛋白表达水平升高(P<0.01)，HDAC1/2 mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05)。沉默HDAC1的细胞p75NTR mRNA及其蛋白表达水平升高(P<0.05)，沉默HDAC2则差异无统计学意义(P>0.05)。
结论β羟丁酸可通过抑制HDAC1，影响p75NTR表达，进而激活p65蛋白，发挥保护神经的作用。