探讨内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase，eNOS）特异性抑制剂L-亚氨基乙基鸟氨酸（L-iminoethyl ornithine hydrochloride，L-NIO）对氟致体外培养人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡、eNOS mRNA和蛋白表达以及一氧化氮（Nitric oxide，NO）含量和一氧化氮合酶（nitric oxide synthase，NOS）活性改变的影响。
方法将体外培养的SH-SY5Y细胞分为对照组、低氟组、高氟组、L-NIO组、低氟+ L-NIO组、高氟+L-NIO组，n=3。对照组加入与实验组等体积的培养液，低氟组和高氟组加入氟化钠（sodium fluoride，NaF）浓度分别为0.2、2.0 mmol/L，L-NIO组加入3 μmol/L L-NIO，低氟+L-NIO组和高氟+L-NIO组分别加入0.2 mmol/L NaF和3 μmol/L L-NIO、2.0 mmol/L NaF和3 μmol/L L-NIO，培养时间为48 h。采用蛋白免疫印迹（Western blot）法检测细胞中eNOS蛋白表达水平，实时荧光定量PCR（Real-time fluorescent quantitative PCR）法检测细胞中eNOS mRNA表达水平，流式细胞仪检测细胞的凋亡情况，硝酸还原酶法和比色法检测细胞培养液中NO含量和NOS活性。
结果与对照组（1.000 ± 0.026）比较，低、高氟组eNOS蛋白表达量（1.108 ± 0.071、1.349 ± 0.057）升高，L-NIO组（0.755 ± 0.148）下降（P均< 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟+L-NIO组（0.802 ± 0.115）下降（P均< 0.05）；与高氟组比较，高氟+L-NIO组（0.988 ± 0.135）下降（P < 0.05）。与对照组（1.000 ± 0.018）比较，低、高氟组eNOS mRNA表达量（1.809 ± 0.099、2.416 ± 0.295）升高，L-NIO组（0.609 ± 0.077）下降（P均< 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟+L-NIO组（1.040 ± 0.034）下降（P均< 0.05）；与高氟组比较，高氟+L-NIO组（1.233 ± 0.152）下降（P < 0.05）。与对照组[（1.66 ± 0.07）%]比较，低、高氟组细胞凋亡率[（8.81 ± 0.27）%、（17.60 ± 0.20）%]升高，L-NIO组[（1.03 ± 0.04）%]下降（P均< 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟+L-NIO组[（6.03 ± 0.10）%]下降（P均< 0.05）；与高氟组比较，高氟+L-NIO组[（12.12 ± 0.08）%]下降（P < 0.05）。与对照组[（2.773 ± 0.145）μmol/L]比较，低、高氟组细胞培养液中NO含量[（8.251 ± 1.047）、（14.287 ± 1.062）μmol/L]升高，L-NIO组[（1.648 ± 0.155）μmol/L]下降（P均< 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟+L-NIO组[（4.622 ± 0.252）μmol/L]下降（P均< 0.05）；与高氟组比较，高氟+L-NIO组[（7.899 ± 0.385）μmol/L]下降（P < 0.05）。与对照组[（0.507 ± 0.041）U/ml]比较，低、高氟组细胞培养液中NOS活性[（0.772 ± 0.032）、（2.258 ± 0.062）U/ml]升高，L-NIO组[（0.346 ± 0.015）U/ml]下降（P均< 0.05）；与低氟组比较，高氟组升高，低氟+L-NIO组[（0.637 ± 0.026）U/ml]下降（P均< 0.05）；与高氟组比较，高氟+L-NIO组[（1.161 ± 0.071）U/ml]下降（P < 0.05）。
结论过量氟可导致SH-SY5Y细胞eNOS蛋白和mRNA过度表达以及细胞凋亡率上升，细胞培养液中NO含量增多以及NOS活性增强，加入L-NIO与氟共培养后可拮抗氟对SH-SY5Y细胞的损伤，起到一定的神经保护作用。