NtSKPl-GFP植物表达载体的构建及亚细胞定位

来源 :西北农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mantou119119

【摘要】

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用PCR技术扩增NtSKPl基因的编码区,定向克隆至表达载体pCAMBIA1302上构建用于瞬时表达NtSKPl蛋白的重组质粒.重组质粒经PCR和测序鉴定后用冻融法转入农杆菌LBA4404,进而经农

【出处】

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西北农业学报

【发表日期】

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2004年期

【关键词】

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NtSKP1基因植物表达载体亚细胞定位

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划);

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用PCR技术扩增NtSKPl基因的编码区,定向克隆至表达载体pCAMBIA1302上构建用于瞬时表达NtSKPl蛋白的重组质粒.重组质粒经PCR和测序鉴定后用冻融法转入农杆菌LBA4404,进而经农杆菌LBA4404介导转入烟草悬浮细胞,激光共聚焦显微镜观察确定其亚细胞定位.测序结果表明,插入片段与预期序列完全一致,与载体形成了一个完整的基因表达盒;亚细胞定位结果表明NtSKPl蛋白在胞浆和核部位均有分布.

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