Rab39A多克隆抗体的制备与鉴定

来源 :厦门大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:lvxinjj
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制备抗人Rab39A多克隆抗体并进行纯化检测,以用于Rab39A功能的研究.选取免疫原性强且特异性高的羧基端42个氨基酸(176~217aa)作为目的片段.PCR法扩增并构建重组表达质粒pGEX4T—lRab39C42.异丙基β-D-硫代半乳糖前(IPTG)诱导表达并纯化GST—Rab39C42融合蛋白,免疫新西兰兔,制备多克隆抗体.然后以亲和层析法纯化抗体,利用Westerrlblot和免疫荧光检测抗体的特异性.结果表明,构建的原核表达载体经IPTG诱导后高效表达(iS-FRab39C42蛋白,纯化后抗
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