Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004株微型基因组的构建及其功能鉴定

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目的本研究旨在构建Ⅰ类新城疫病毒NDV08—004的微型基因组和辅助质粒,为构建病毒拯救体系奠定基础。方法根据Ⅰ类新城疫病毒NDV08—004的全基因组序列,采用SOE方法将增强绿色荧光蛋白基因(eGFP)插入NDV08—004的3’-Leader和5’-Trailer区域之间后反向插入转录载体pOLTV5中,构建了NDV08—004的微型基因组pLGT-03。将pLGT-03转染辅助病毒NDV08—004感染的表达T7RNA聚合酶BSRT7/5细胞进行功能鉴定。采用RT-PCR将NDV08-004的NP
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