探讨人脐带源间充质干细胞(HUC-MSC)条件培养液(CM)对人肝癌HepG₂细胞生长的影响。

选择2011年2月至2014年1月于中国人民解放军第105医院妇产科分娩的35例足月妊娠剖宫产健康胎儿脐带为研究对象，取其用于分离、培养并扩增HUC-MSC。传代扩增至第3代HUC-MSC融合达80%时，更换培养液，继续培养24 h后收集上清液，即为HUC-MSC-CM备用。将对数生长期的人肝癌HepG₂细胞按照随机数字表法随机分成相等的3份，分别于含50%，20%及不含HUC-MSC-CM的培养中培养，并分别纳入高含量组、低含量组和空白对照组。采用倒置显微镜观察人肝癌HepG₂细胞生长状态，采用3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法和细胞划痕愈合实验分别检测3组人肝癌HepG₂细胞增殖和迁移情况，并采用流式细胞术(FCM)法检测各组细胞的细胞周期变化情况。本研究遵循的程序符合中国人民解放军第105医院人体试验委员会所制定的伦理学标准，得到该委员会批准，脐带获取前，均征得孕妇知情同意，并与之签署临床研究知情同意书。

①所分离的原代HUC-MSC培养至第3代后，细胞形态开始比较均一。②MTT法检测结果显示，人肝癌HepG₂细胞培养24，48和72 h时，3组相对吸光度(A)值比较，差异均有统计学意义(F＝21.330，6.223，9.345；P＝0.004，0.032，0.027)，且在这3个时间点，高含量组和低含量组相对A值均显著高于空白对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，高含量组相对A值亦显著高于低含量组，差异亦均有统计学意义(P<0.05)。③划痕愈合实验结果显示，3组人肝癌HepG₂细胞过河时间比较，差异有统计学意义(F＝12.860，P＝0.025)，且高含量组人肝癌HepG₂细胞过河时间短于低含量组和空白对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)，低浓度组人肝癌HePG₂细胞过河时间亦短于对照组，差异亦有统计学意义(P<0.05)。④FCM法检测人肝癌HepG₂细胞周期结果显示，3组G0/G1期和S期人肝癌HepG₂细胞比例比较，差异均有统计学意义(F＝30.600，30.590；P<0.05)。且与空白对照组相比，高含量组和低含量组人肝癌HepG₂细胞G0/G1期细胞比例显著降低，S期细胞比例显著增加，差异均有统计学意义(P<0.01)；且高含量组G0/G1期细胞比例比低含量组下降更显著，而S期细胞比例显著增加，差异均有统计学意义(P<0.05)。

HUC-MSC-CM可促进人肝癌HepG₂细胞增殖和迁移，并可促进人肝癌HepG₂细胞周期G1/S转换。