纳豆激酶基因工程菌的构建及酶活力分析

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纳豆激酶由纳豆芽孢杆菌(Bacillussubtilisnatto)的aprN基因编码,在体内外具有很强的溶解纤维蛋白活性.利用聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)技术扩增B.subtilisnatto的aprN基因,并依据B.subtilis的密码子偏好性优化了起始30个氨基酸的密码子,构建了重组表达质粒pHT01-aprN.经限制性酶酶切、PCR扩增和测序验证了其编码的正确性.通过电击法将含有强启动子的pHT01-aprN导入B.subtilis,利用氯霉素抗性筛选
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