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【摘要】目的 相容性输血。 方法 不规则抗体的筛选、鉴定与交叉配血。 结果 检出抗-JKb抗体，抗-Ec抗体及自身抗体，与多份ABO、RH同型的血液交叉配血，挑选凝集强度最弱的应急输血。结论 对于直抗阳性标本进一步做抗体鉴定，挑选避开该抗体的血液进行配血，存在自身抗体干扰交叉配血时挑选凝集强度最弱的应急输血。
【关键词】 交叉配血 抗-JKb抗体 抗-Ec抗体
现将在上海市血液中心血型参比实验室学习期间所遇到的疑难配血一例报告如下：
一般资料
患者：陈×× ，男，61岁，来自上海市第六人民医院，临床诊断：骨髓增生异常综合征;输血史：3次，末次输血：2014年9月;要求：特配三洗红细胞。
血清学检查
1.试剂和仪器：抗-A、抗-B血清（批号：20130509）、IgM抗D（批号：20130322）、反定型ABO红细胞（批号：20145320））、IgM抗E（批号：20133201）、IgM抗C（批号：20143001）、IgM抗c（批号：20133102）、IgM抗e（批号：20133302）、多特异性抗人球蛋白试剂（批号：20130904）、单抗IgG（批号：20140108）、抗C3（批号：20130807）、国谱（批号：20145706）均来自上海血液生物医药有限公司，进口谱细胞（批号：8000211388）、IgM抗JKa（批号：8000184076）、IgM抗JKb（批号：8000197772）来自Sanquin公司，抗人球蛋白卡（批号：50531.89.14）来自DiaMed，所有试剂均在有效期内， 久保田离心机、37度水浴箱等。
2.实验方法：严格按照上海市血液中心血型参比研究室《血型和血液免疫学常规检查操作细则》進行操作。全部实验均在上海市血液中心血型参比研究室完成。
3.实验结果：
3.1盐水介质试管法直接抗人球蛋白实验
3.2国谱细胞鉴定抗体特异性实验（卡氏法）
从表中可以看出3号和7号反应比较弱，首先怀疑JKb抗体的存在，但不能排除抗-Ec抗体！
3.3进口谱细胞进一步鉴定抗体特异性实验（卡氏法）
3.4盐水介质试管法ABO及Rh分型、Kidd系统分型
注：进1#、 进2# 、国2#均为CCDee表型， JKb阳性细胞;筛2#、 国3#、 献13#均为CCDee表型，JKb阴性细胞;进6#、 进15#分别为ccdEE和ccDEE表型，且JKb皆为阴性细胞;进8# 、进9#均为ccdee表型， JKb阴性细胞。以上细胞跟患者血清反应，根据实验结果可证实该患者血清中确实存在抗-c抗-JKb抗体，但还不能证实是否还含有抗-E抗体！自身和直抗所用的细胞均为温盐水6洗后的患者细胞，以排除自身抗体对实验结果的影响！
3.6患者吸收液和放散液进一步鉴定抗体特异性实验（卡氏法）
注：用Ec阴性，JKb阳性细胞进行吸收，结果提示放散液中放散下来的抗体为JKb抗体，但吸收液中仍旧不能证实为抗Ec抗体！造成这以原因可能是抗JKb抗体和自身抗体还没有吸收干净！接下来我们再次对患者血清进行两次吸收，结果如下：
3.7进口谱细胞鉴定三次吸收后抗体特异性实验（卡氏法）
根据实验结果，结合计量效应，确定为抗-Ec的联合抗体！由此可证实该患者血清中亦存在抗-E抗体！
3.8三次吸收后的患者血清再分别与献13#和筛2#细胞反应结果：
由此可说明3.5的表中的献13#和筛2#细胞呈弱阳性实为自身抗体的干扰。
3.9.交叉配血实验：选献13# 献血样本（CCDee， JKb阴性），与患者进行主侧配血，结果凝聚胺法为阴性，抗人球蛋白法弱阳性，两者自身对照均为弱阳性。
4.结论：该患者血型为B型，Rh阳性，CCDee，JK（a+b-），血清中检出不规则抗体，为抗JKb抗体和抗-Ec抗体！该患者血样与献13# 献血者血样（CCDee， JKb阴性）进行主侧配血，在盐水和聚凝胺介质中均无凝集无溶血现象，在抗人球介质中有凝集无溶血现象，上述献血者洗涤红细胞2单位可供患者输注，输注时应放慢速度，密切观察！
5.讨论
5.1.Kidd血型系统中的抗-JKa和抗-JKb抗体是易于结合补体的IgG抗体，多抗体存在，有剂量效应！而Rh系统的抗体除抗D外，其他抗体也会引起输血反应。其中抗-E抗体最常见，其次为抗-c抗体，这些抗体可为天然发生，但大多为免疫产生，且抗-E和抗-c常常同时出现，为联合抗体，可造成严重的溶血性输血反应。
5.2.本案例中自身抗体和多种抗体同时存在，自身抗体往往容易掩盖同种抗体，给抗体鉴定带来很大的困难，因此，我们在做抗体鉴定碰到复杂或不明朗的格局时可以增加一些附加实验，如进行抗体验证试验、吸收放散实验、温水洗涤红细胞以排除自身抗体对同种抗体检测的干扰实验等，并运用一些分析技巧，如看有无剂量效应，叠加加分等，红细胞相应抗原的检测也是检测抗体的必要补充！本次实验是名男性，有过三次输血史，抗体可能是由于曾经输过不配合的血液产生的，要善于将国谱和进口谱细胞结合起来分析，做免疫学检查时要认真细致，保证结果的准确性和真实性，配合临床的治疗，以达到输血安全的目的！
参考文献：
1.上海市血液中心血型和血液免疫学常规操作细则。
2.上海市血液中心免疫学讲义。
3.刘知兰， 王学惠， 赵月凯. 不规则抗体筛查与输血安全分析[J]. 中国误诊学杂志， 2007， 7（17）.
作者简介：杜新凤（1985-1），性别：女，民族：壮族，籍贯：广西南宁，职称：中级职称，学历：本科，单位：玉林市中心血站，研究方向：酶免、输血，单位
玉林市中心血站 广西玉林 537000
【关键词】 交叉配血 抗-JKb抗体 抗-Ec抗体
现将在上海市血液中心血型参比实验室学习期间所遇到的疑难配血一例报告如下：
一般资料
患者：陈×× ，男，61岁，来自上海市第六人民医院，临床诊断：骨髓增生异常综合征;输血史：3次，末次输血：2014年9月;要求：特配三洗红细胞。
血清学检查
1.试剂和仪器：抗-A、抗-B血清（批号：20130509）、IgM抗D（批号：20130322）、反定型ABO红细胞（批号：20145320））、IgM抗E（批号：20133201）、IgM抗C（批号：20143001）、IgM抗c（批号：20133102）、IgM抗e（批号：20133302）、多特异性抗人球蛋白试剂（批号：20130904）、单抗IgG（批号：20140108）、抗C3（批号：20130807）、国谱（批号：20145706）均来自上海血液生物医药有限公司，进口谱细胞（批号：8000211388）、IgM抗JKa（批号：8000184076）、IgM抗JKb（批号：8000197772）来自Sanquin公司，抗人球蛋白卡（批号：50531.89.14）来自DiaMed，所有试剂均在有效期内， 久保田离心机、37度水浴箱等。
2.实验方法：严格按照上海市血液中心血型参比研究室《血型和血液免疫学常规检查操作细则》進行操作。全部实验均在上海市血液中心血型参比研究室完成。
3.实验结果：
3.1盐水介质试管法直接抗人球蛋白实验
3.2国谱细胞鉴定抗体特异性实验（卡氏法）
从表中可以看出3号和7号反应比较弱，首先怀疑JKb抗体的存在，但不能排除抗-Ec抗体！
3.3进口谱细胞进一步鉴定抗体特异性实验（卡氏法）
3.4盐水介质试管法ABO及Rh分型、Kidd系统分型
注：进1#、 进2# 、国2#均为CCDee表型， JKb阳性细胞;筛2#、 国3#、 献13#均为CCDee表型，JKb阴性细胞;进6#、 进15#分别为ccdEE和ccDEE表型，且JKb皆为阴性细胞;进8# 、进9#均为ccdee表型， JKb阴性细胞。以上细胞跟患者血清反应，根据实验结果可证实该患者血清中确实存在抗-c抗-JKb抗体，但还不能证实是否还含有抗-E抗体！自身和直抗所用的细胞均为温盐水6洗后的患者细胞，以排除自身抗体对实验结果的影响！
3.6患者吸收液和放散液进一步鉴定抗体特异性实验（卡氏法）
注：用Ec阴性，JKb阳性细胞进行吸收，结果提示放散液中放散下来的抗体为JKb抗体，但吸收液中仍旧不能证实为抗Ec抗体！造成这以原因可能是抗JKb抗体和自身抗体还没有吸收干净！接下来我们再次对患者血清进行两次吸收，结果如下：
3.7进口谱细胞鉴定三次吸收后抗体特异性实验（卡氏法）
根据实验结果，结合计量效应，确定为抗-Ec的联合抗体！由此可证实该患者血清中亦存在抗-E抗体！
3.8三次吸收后的患者血清再分别与献13#和筛2#细胞反应结果：
由此可说明3.5的表中的献13#和筛2#细胞呈弱阳性实为自身抗体的干扰。
3.9.交叉配血实验：选献13# 献血样本（CCDee， JKb阴性），与患者进行主侧配血，结果凝聚胺法为阴性，抗人球蛋白法弱阳性，两者自身对照均为弱阳性。
4.结论：该患者血型为B型，Rh阳性，CCDee，JK（a+b-），血清中检出不规则抗体，为抗JKb抗体和抗-Ec抗体！该患者血样与献13# 献血者血样（CCDee， JKb阴性）进行主侧配血，在盐水和聚凝胺介质中均无凝集无溶血现象，在抗人球介质中有凝集无溶血现象，上述献血者洗涤红细胞2单位可供患者输注，输注时应放慢速度，密切观察！
5.讨论
5.1.Kidd血型系统中的抗-JKa和抗-JKb抗体是易于结合补体的IgG抗体，多抗体存在，有剂量效应！而Rh系统的抗体除抗D外，其他抗体也会引起输血反应。其中抗-E抗体最常见，其次为抗-c抗体，这些抗体可为天然发生，但大多为免疫产生，且抗-E和抗-c常常同时出现，为联合抗体，可造成严重的溶血性输血反应。
5.2.本案例中自身抗体和多种抗体同时存在，自身抗体往往容易掩盖同种抗体，给抗体鉴定带来很大的困难，因此，我们在做抗体鉴定碰到复杂或不明朗的格局时可以增加一些附加实验，如进行抗体验证试验、吸收放散实验、温水洗涤红细胞以排除自身抗体对同种抗体检测的干扰实验等，并运用一些分析技巧，如看有无剂量效应，叠加加分等，红细胞相应抗原的检测也是检测抗体的必要补充！本次实验是名男性，有过三次输血史，抗体可能是由于曾经输过不配合的血液产生的，要善于将国谱和进口谱细胞结合起来分析，做免疫学检查时要认真细致，保证结果的准确性和真实性，配合临床的治疗，以达到输血安全的目的！
参考文献：
1.上海市血液中心血型和血液免疫学常规操作细则。
2.上海市血液中心免疫学讲义。
3.刘知兰， 王学惠， 赵月凯. 不规则抗体筛查与输血安全分析[J]. 中国误诊学杂志， 2007， 7（17）.
作者简介：杜新凤（1985-1），性别：女，民族：壮族，籍贯：广西南宁，职称：中级职称，学历：本科，单位：玉林市中心血站，研究方向：酶免、输血，单位
玉林市中心血站 广西玉林 537000