论文部分内容阅读
目的：探讨细胞自噬在小鼠肝细胞胰岛素抵抗中的作用以及microRNA调控自噬的机制。方法通过高脂饮食诱导小鼠糖尿病模型， Western印迹检测高脂饮食组小鼠肝细胞自噬相关蛋白（ autophagy?re?lated protein 7， ATG7）的表达。生物信息学预测调控ATG7的候选microRNA。借助于双荧光素酶报告基因方法验证miR?17对ATG7的靶向调控作用。采用葡萄糖胺诱导小鼠肝原代细胞的胰岛素抵抗模型，验证miR?17调控自噬对小鼠原代肝细胞胰岛素敏感性的作用。结果高脂饮食诱导小鼠胰岛素抵抗模型中肝细胞ATG7蛋白表达显著下调，而miR?17的表达增高。双荧光素酶报告基因检测结果显示， miR?17可以直接结合于ATG7的3′UTR靶向调控ATG7，降低其的表达。小鼠肝原代细胞胰岛素抵抗模型的结果表明，抑制内源性miR?17的水平可以上调ATG7蛋白表达，增强细胞胰岛素敏感性。结论 miR?17通过靶向调控小鼠肝细胞中自噬相关蛋白ATG7的表达，抑制细胞自噬，参与了肝细胞的胰岛素抵抗。